Kit de purification d'ARN d'une cellule unique
Purification rapide de l'ARN total - y compris le microARN - à partir de petits volumes d'entrée
Kit de purification d'ARN d'une cellule unique
Purification rapide de l'ARN total - y compris le microARN - à partir de petits volumes d'entrée
Aperçu du produit
Kit très sensible conçu pour travailler avec une seule cellule et jusqu'à 100 000 cellules. La conception spéciale de la micro-colonne d'essorage permet d'obtenir un petit volume d'élution de 8 µL seulement.
Méthode rapide de 15 minutes pour l'isolement et la purification de l'ARN total (y compris l’ARN micro) à partir de petites quantités d’entrée de cellules animales en culture, de CTC, de cellules souches, de cellules immunotriées et d’échantillons microdisséqués, y compris la microdissection par capture laser (LCM). L'ARN purifié est d'une pureté et d'une intégrité maximales et peut être utilisé dans un certain nombre d'applications de qRT-PCR et de PCR numérique, ainsi que dans d'autres applications de transcriptome entier.
Détails
Données justificatives
Figure 1. Meilleure efficacité de la récupération de l'ARN à partir d'une seule cellule.. Le kit de purification de l'ARN monocellulaire de Norgen permet une extraction sensible de l'ARN à partir d'une seule cellule et surpasse les kits concurrents qui déclarent une sensibilité similaire. L'ARN total a été extrait d'un nombre décroissant de cellules HeLa à l'aide du kit de purification de l'ARN d'une cellule unique de Norgen et d'un kit de purification par colonne de spin d'un concurrents. L'ARN extrait a été soumis à la RT-qPCR pour détecter les transcriptions de l'ARNr S15 et 5S humain dans l'ARN isolé. L'ARN isolé par le kit de purification de l'ARN des cellules individuelles de Norgen a montré une expression relative beaucoup plus élevée de chaque transcrit d'ARN testé pour tous les nombres d'entrées de cellules jusqu'à la cellule unique.
Figure 2. ARN de haute qualité isolé à partir d'une microdissection capturée au laser (MCL). Le kit de purification de l'ARN des cellules individuelles de Norgen permet une extraction sensible et de haute qualité de l'ARN à partir de petites entrées telles que la microdissection capturée au laser (LCM). L'ARN total a été isolé à partir de 6 échantillons différents de la MCL. Le rendement et la qualité de l'ARN (rapport 260/280) ont été évalués par spectrophotométrie NanoVue. Le kit de purification de l'ARN des cellules individuelles de Norgen a permis de récupérer de bonnes quantités d'ARN avec un excellent rapport 260/280.
Figure 3. Récupération cohérente et linéaire de toutes les tailles d'ARN jusqu'à l'entrée d'une seule cellule. Le kit de purification de l'ARN d'une seule cellule de Norgen permet une extraction sensible de l'ARN à partir d'une seule cellule avec une grande linéarité. L'ARN total a été extrait d'un nombre décroissant de cellules HeLa à l'aide du kit de purification de l'ARN d'une cellule unique de Norgen. L'ARN extrait a été soumis à la RT-qPCR pour détecter toutes les tailles d'ARN, y compris le S15 humain (ARNm), la transcription de l'ARNr 5S (petit ARN) et le miR-21 (ARN micro). L'ARN isolé par le kit de purification de l'ARN d'une seule cellule de Norgen a montré une très grande cohérence (plus de 99 %) de récupération de chaque transcrit d'ARN testé pour tous les nombres de cellules d'entrée jusqu'à une seule cellule.
|
Spécifications du kit
|
|
|
Capacité de liaison maximale de la colonne
|
10 μg
|
|
Volume maximal de chargement de la colonne
|
650 μL
|
|
Volume d'élution minimal
|
8 μL |
| Taille de l'ARN purifié |
Toutes les tailles, y compris les petits ARN (<200 nt)
|
|
Quantité maximale de matériel de départ :
Cellules animales
Microdissection par capture laser (LCM) |
de la cellule unique à 2 x 105 cellules
Jusqu'à 2 x 105 cellules |
|
Temps pour effectuer 10 purifications
|
20 minutes
|
|
Rendement moyen : Cellules HeLa (1 x 105 cellules) Cellules HeLa (100 cellules) Cellules HeLa (1 cellule) |
~ 1,5 µg ~ 1,5 ng ≥ 1pg |
Conditions de stockage et stabilité du produit
Toutes les solutions doivent être maintenues hermétiquement fermées et conservées à température ambiante. Ce kit est stable pendant 2 ans après la date d'expédition.