Aperçu du produit

Les dispositifs de collecte et de préservation d’ARN salivaire Dx de Norgen sont conçus pour 1) l’auto-collection supervisé sûr et non invasif d’échantillons de salive et 2) la préservation d’ARN dans les échantillons de salive à température ambiante. Chacun des 50 dispositifs Dx de collecte et de préservation d'ARN de la salive est composé de 3 éléments : (1) entonnoir et tube de collection de salive, (2) bouchon du tube de collection, et (3) conservateur d'ARN de salive de Norgen contenu dans une ampoule compressible scellée. La collection de salive se fait par auto-collection supervisé. Les échantillons de salive sont recueillis en crachant à l'intérieur de l'entonnoir de collecte qui a été assemblé avec le tube de collecte. Après avoir recueilli le volume de salive nécessaire, l'entonnoir de collecte est retiré et le contenu de l'ampoule de conservation est ajouté et mélangé à la salive recueillie. Le tube de collection de salive est ensuite envoyé au laboratoire pour l'isolement et l'analyse d'ARN. L'ARN peut être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide des kits de purification d'ARN de la salive de Norgen (Cat# Dx69100, Dx69300). Chaque tube de collecte est étiqueté avec un numéro de série unique qui peut être utilisé pour un suivi sécurisé et anonyme de l'échantillon. L'ARN de la salive dans les échantillons conservés est stable jusqu'à 2 mois à température ambiante. Ce kit est idéal pour collecter et préserver des échantillons d'ARN en vue d'un diagnostic in vitro à des fins médicales. Ce kit peut être utilisé pour collecter et préserver l'ARN viral, y compris l'ARN du SARs-CoV-2 pour la détection du COVID-19.

Les dispositifs de prélèvement et de conservation de l'ARN de la salive Dx de Norgen ne fournissent pas de résultat diagnostique. Il est de la seule responsabilité de l'utilisateur d'utiliser et de valider ces dispositifs en conjonction avec un essai de diagnostic in vitro en aval.

CONSERVATEUR DE L'ARN SALIVAIRE

Le conservateur d’ARN salivaire de Norgen est un tampon de stockage aqueux conçu pour la lyse cellulaire rapide et la préservation ultérieure de l’ARN des échantillons de salive fraîche. Le tampon élimine la nécessité de traiter ou de congeler immédiatement les échantillons et permet de les expédier à température ambiante vers des installations d'essai centralisées. Les composants du tampon permettent de conserver les échantillons jusqu'à 2 mois à température ambiante. Le conservateur d'ARN salivaire inactive également toutes les bactéries, levures et virus présents dans l'échantillon de salive.

ISOLATION DE L'ACIDE NUCLÉIQUE À PARTIR D'UN CONSERVATEUR

L'ARN de la salive peut être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide des kits de purification de l'ARN de la salive/du tampon Dx de Norgen (Cat# Dx69100, Dx69300). Pour minimiser les irrégularités dans les résultats du diagnostic, il convient d'utiliser des contrôles appropriés pour les applications en aval.

Détails

Données justificatives

Figure 1. Isolement de l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma. Le mini kit de purification des exosomes et d'isolement de l'ARN du plasma/sérum de Norgen (Cat# 58300) a été utilisé pour isoler l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma à l'aide du même kit. Deux microlitres de l'ARN isolé ont ensuite été utilisés comme modèle dans les réactions de RT-qPCR pour évaluer l'amplification du miR-26a exosomal plasmatique isolé. (A) Le miR-26a exosomal plasmatique diminue linéairement avec l'augmentation du volume de l'échantillon. (B) La quantité relative de miR-26a exosomal dans le plasma montre une excellente linéarité avec un pourcentage de récupération de plus de 90 %.

Figure 2. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma en utilisant différentes méthodes de purification. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma en utilisant le mini kit de purification d'exosomes et d'isolement d'ARN pour plasma/sérum de Norgen (Cat# 58300), le kit du concurrent S et le kit du concurrent L (à partir du plasma). Les exosomes purifiés à l'aide du kit de Norgen ont été remis en suspension dans 200 µL de tampon ExoR de Norgen, dilués à 1:1 000 et visualisés sur l'instrument NanoSight LM10. L'analyse montre que le kit de Norgen a isolé des exosomes de 55 nm avec une récupération de 9,64 x 1013 particules/mL de plasma. Aucune impureté n'a été décelée dans les exosomes purifiés à l'aide du kit de purification des exosomes de plasma/sérum et d'isolement de l'ARN de Norgen. En outre, des exosomes avec une gamme de taille plus large couvrant 50 nm - 150 nm ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma avec une concentration plus élevée par rapport aux deux autres méthodes.

Figure 3. Exosomes intacts purifiés à partir de 1 ml et 10 ml de plasma. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma à l'aide du mini kit de purification d'exosomes et d'isolement d'ARN pour plasma/sérum de Norgen (Cat# 58300) et à partir de 10 ml de plasma à l'aide du maxi kit de purification d'exosomes et d'isolement d'ARN pour plasma/sérum de Norgen (Cat# 58600). Les exosomes purifiés à l'aide du mini kit de Norgen ont été remis en suspension dans 200 µL de tampon ExoR de Norgen, tandis que les exosomes purifiés à l'aide du Maxi kit de Norgen ont été remis en suspension dans 600 µL de tampon ExoR de Norgen, dilués à 1:1 000 et visualisés sur l'instrument NanoSight LM10. L'analyse montre que la purification des exosomes est linéaire puisque 4,04 x 1010 particules/mL ont été récupérées à partir de 1 mL de plasma, tandis que 2,95 x 1011 particules/mL ont été récupérées à partir de 10 mL de plasma.

Figure 4. Isolement de l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma. Le kit Midi de purification des exosomes et d'isolation de l'ARN du plasma/sérum de Norgen (Cat# 58500) a été utilisé pour isoler l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma à l'aide du même kit. Deux microlitres de l'ARN isolé ont ensuite été utilisés comme modèle dans les réactions de RT-qPCR pour évaluer l'amplification du miR-26a exosomal plasmatique isolé. (A) Le miR-26a exosomal plasmatique diminue de façon linéaire avec l'augmentation du volume de l'échantillon. B) La quantité relative de miR-26a exosomal dans le plasma montre une excellente linéarité avec un pourcentage de récupération de plus de 90 %.

Figure 5. Isolement de l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma. Le kit Maxi de purification des exosomes et d'isolation de l'ARN du plasma/sérum de Norgen (Cat# 58600) a été utilisé pour isoler l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma à l'aide du même kit. Deux microlitres de l'ARN isolé ont ensuite été utilisés comme modèle dans les réactions de RT-qPCR pour évaluer l'amplification du miR-26a exosomal plasmatique isolé. (A) Le miR-26a exosomal plasmatique diminue de façon linéaire avec l'augmentation du volume de l'échantillon. B) La quantité relative de miR-26a exosomal dans le plasma montre une excellente linéarité avec un pourcentage de récupération de plus de 90 %.

Figure 6. Des exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma en utilisant différentes méthodes de purification. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 mL de plasma en utilisant le mini kit de purification des exosomes et d'isolement de l'ARN du plasma/sérum de Norgens (Cat# 58300), le kit du concurrent S et le kit du concurrent L (à partir du plasma). Les exosomes purifiés à l'aide du kit Norgens ont été remis en suspension dans 200 µL de tampon Norgens ExoR, dilués à 1:1 000 et visualisés sur l'instrument NanoSight LM10. L'analyse montre que le kit de Norgen a isolé des exosomes de 55 nm avec une récupération de 9,64 x 10^13 particules/mL de plasma. Aucune impureté n'a été trouvée dans les exosomes purifiés à l'aide du mini kit de purification des exosomes de plasma/sérum et d'isolation de l'ARN de Norgens. De plus, des exosomes avec une gamme de taille plus large couvrant 50 nm - 150 nm ont été purifiés à partir de 1 mL de plasma avec une concentration plus élevée par rapport aux deux autres méthodes.

Spécifications du kit
Entrée minimale de plasma/sérum	50 μL
Entrée maximale de plasma/sérum	1 mL
Taille des exosomes purifiés	40 nm à 150 nm
Taille de l'ARN purifié	Toutes les tailles, y compris les ARN micro et les petits ARN (< 200 nt)
Volume d'élution	50 à 100 μL
Temps nécessaire pour effectuer 10 purifications	35 à 40 minutes
Rendement moyen*	Variable selon le spécimen

*Veuillez consulter la page 4 de la notice du produit pour connaître les rendements moyens et les méthodes courantes de quantification de l'ARN.

Conditions de stockage et stabilité du produit
Toutes les solutions doivent être maintenues hermétiquement fermées et conservées à température ambiante. Ce kit est stable pendant 2 ans après la date d'expédition. Il est recommandé de réchauffer le Lysis Buffer A pendant 20 minutes à 60°C si une précipitation de sel est observée.

Remarque importante
Ce kit est adapté à la purification des exosomes à partir de sérum ou de plasma frais ou congelé préparé à partir de sang collecté sur EDTA ou Citrate. Les échantillons de plasma préparés à partir de sang collecté sous héparine ne doivent pas être utilisés car l'héparine peut interférer de manière significative avec de nombreuses applications en aval telles que la RT-PCR.

Documentation

VOTRE PANIER, 0 article(s)

Kits de purification d'exosomes de plasma/sérum et d'isolation de l'ARN