Dispositifs de collecte et de préservation de l'ADN salivaire

Aperçu du produit

Les dispositifs de collecte et de préservation de l'ADN salivaire de Norgen sont conçus pour 1) la collection simple et non invasif de salive et 2) la préservation de l'ADN dans les échantillons de salive à température ambiante. Chacun des 50 dispositifs de prélèvement et de conservation de l'ADN salivaire se compose de trois éléments : (1) entonnoir et tube de collection de salive, (2) bouchon du tube de collection et (3) conservateur d'ADN de salive de Norgen contenu dans une ampoule compressible scellée. Les échantillons de salive sont recueillis en crachant à l'intérieur de l'entonnoir de collecte qui a été assemblé avec le tube de collecte. Après avoir recueilli le volume de salive nécessaire, l'entonnoir de collecte est retiré et le contenu de l'ampoule de conservation est ajouté et mélangé à la salive recueillie. Le tube de prélèvement de salive est ensuite envoyé au laboratoire pour l'isolement et l'analyse de l'ADN. L'ADN peut être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide du kit d'isolement de l'ADN de la salive de Norgen (Cat# RU45400). Chaque tube de collecte Norgen est étiqueté avec un numéro de série unique qui peut être utilisé pour un suivi sécurisé et anonyme de l'échantillon. L'ADN salivaire des échantillons conservés est stable pendant plus de deux ans à température ambiante. Ce kit est idéal pour la collecte et la conservation d'échantillons d'ADN dans le cadre d'études épidémiologiques et démographiques.

Conservateur d'ADN salivaire

Le conservateur d'ADN de salive de Norgen est un tampon de stockage aqueux conçu pour la lyse cellulaire rapide et la préservation ultérieure d'ADN à partir d'échantillons frais. Le tampon empêche la croissance des bactéries et des champignons Gram négatif et Gram positif et inactive également les virus, ce qui permet de manipuler et d'expédier en toute sécurité les échantillons non infectieux qui en résultent. En outre, le tampon élimine la nécessité de traiter ou de congeler immédiatement les échantillons et permet de les expédier à température ambiante vers des installations d'essai centralisées. Les composants du tampon permettent de conserver les échantillons pendant plus de deux ans sans dégradation détectable d'ADN.

Isolement de l'ADN à partir d'un conservateur

Avant d'isoler l'ADN de la salive, mélanger au vortex le tube de collecte contenant la salive conservée pendant 10 secondes et l'incuber à 55°C pendant une heure. L'ADN salivaire peut maintenant être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide de toute méthode disponible dans le commerce, y compris le kit d'isolement de l'ADN salivaire de Norgen (Cat# RU45400), le kit d'isolement de l'ADN salivaire de Norgen à 96 puits (Cat. RU35200) et le kit d'isolement de l'ADN de la salive de Norgen (système de billes magnétiques) (Cat. RU55400, RU62900). En outre, le kit de réactifs pour l'isolement de l'ADN de la salive de Norgen (jusqu'à 4 mL) (Cat. RU35720) permet d'isoler l'ADN des échantillons de salive conservés à l'aide d'une méthode de précipitation dans l'alcool. L'ADN purifié est de la plus haute qualité et peut être utilisé dans un certain nombre d'applications en aval, y compris la PCR, la NGS et l'analyse de puces à ADN.

Détails

Données justificatives

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Figure 1. Stabilité de l'ADN conservé dans le conservateur d'ADN salivaire de Norgen à température ambiante pendant plus de 2 ans. Des échantillons de salive ont été prélevés sur de nombreux donneurs et mélangés, puis un volume égal de conservateur d'ADN salivaire de Norgen a été ajouté à la salive. La salive conservée a ensuite été stockée à température ambiante pendant 24 mois. L'ADN salivaire a ensuite été isolé à 4 mois, 8 mois, 16 mois et 24 mois à partir de 0,5 mL de l'échantillon de salive/préservation à l'aide du kit d'isolement de l'ADN salivaire de Norgen (Cat. RU45400). Pour l'analyse visuelle, 100 µL de l'ADN purifié ont été placés sur un gel d'agarose TAE. Comme on peut le constater, il n'y a aucune preuve de dégradation de l'ADN après que les échantillons de salive ont été stockés pendant 24 mois à température ambiante dans le conservateur d'ADN de salive de Norgen. En outre, la taille de l'ADN est restée supérieure à 24 kb pendant toute la période de 24 mois. M : Échelle d'ADN UltraRanger 1 Kb de Norgen (Cat. 12100).

Figure 2. Amplification par PCR en temps réel de l'ADN de la GAPDH à partir d'échantillons de salive conservés à température ambiante du jour 0 jusqu'à 24 mois. Tous les échantillons d'ADN de salive isolés ont été amplifiés avec succès sans aucun signe d'inhibition de la PCR ni de différence de Ct. Rouge : Jour 0, bleu : 4 mois, violet : 8 mois, vert : 16 mois et bleu ciel : 24 mois. Noir : Contrôle.

Figure 3. Amplification PCR de l'ARNr 16s V3-V4 pour la préparation de la bibliothèque d'ARNr 16s Illumina MiSeq. L'ADN de la salive a été isolé à l'aide du kit d'isolement de l'ADN de la salive de Norgen (Cat. RU45400) à partir de salive conservée pendant différentes périodes allant jusqu'à 2 ans à température ambiante dans le conservateur d'ADN de salive Norgen. Le résultat de la PCR montre une amplification propre à ~550 bp indiquant la bonne cible de l'ARNr 16s V3-V4, sans différence entre le jour 0 et le jour 24. M : Échelle d'ADN FastRunner (Cat. 12800)

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Documentation