Aperçu du produit

Les tubes de conservation des acides nucléiques totaux de Norgen sont conçus pour la conservation et le transport à température ambiante des acides nucléiques totaux (ADN et ARN) provenant d'échantillons prélevés à l'aide d'un écouvillon, notamment nasal, buccal, salivaire, fécal, cutané, de surface, etc. Les tubes de conservation de l'acide nucléique total contiennent le conservateur de l'acide nucléique total de Norgen sous forme liquide. L'utilisateur recueille simplement l'échantillon à l'aide d'un écouvillon stérile floqué en nylon (non fourni), puis transfère l'écouvillon dans le conservateur d'acide nucléique total. L'agent de conservation empêche la croissance des bactéries et des champignons Gram négatif et Gram positif et inactive les virus, ce qui permet de manipuler et d'expédier en toute sécurité les échantillons non infectieux qui en résultent. En outre, le conservateur d'acide nucléique total élimine la nécessité de traiter ou de congeler immédiatement les échantillons et permet de les expédier à des installations d'analyse centralisées à des températures ambiantes. Les composants du conservateur permettent de conserver les échantillons d'ADN à température ambiante pendant plus de 4 mois et les échantillons d'ARN à température ambiante pendant plus de 2 mois.
Les échantillons prélevés et conservés à l'aide des tubes de conservation de l'acide nucléique total de Norgen sont compatibles avec la plupart des méthodes d'isolement de l'ADN et de l'ARN disponibles dans le commerce. Les échantillons conservés dans les tubes ont été utilisés avec succès avec la plupart des kits et réactifs d'isolation de l'ADN et de l'ARN de Norgen Biotek, y compris le kit de purification de l'ARN total de Norgen (Cat# 17200) et le kit d'isolation de l'ADN de la salive de Norgen (Cat# RU45400). Pour la purification des acides nucléiques totaux, veuillez vous référer au protocole supplémentaire fourni avec le kit de purification de l'ARN total de Norgen (Cat. #17200).

Détails

Données justificatives

Figure 1. Stabilité de l'ARN et de l'ADN conservés dans le conservateur d'acide nucléique total de Norgen. La GAPDH (pour l'ADN) et la β-actine (pour l'ARN) ont été contrôlées sur une période de 18 semaines pour l'ADN et de 60 jours pour l'ARN à partir d'échantillons d'écouvillons conservés à température ambiante dans des tubes de conservation de l'acide nucléique total de Norgen. L'ARN a été isolé à partir de 250 µl d'échantillons d'écouvillons conservés aux jours 0, 4, 6, 10, 16, 30 et 60 à l'aide du kit d'isolement de l'ARN total de Norgen (n° de cat. 17200). L'ADN a été isolé à partir de 250 µL d'échantillons d'écouvillons conservés au jour 0 et à 18 semaines à l'aide du kit d'isolement de l'ADN de la salive Norgen (Cat# Dx45400). Ensuite, 4 µL d'élution ont été utilisés dans une réaction de PCR en temps réel de 20 L à l'aide du système de détection de PCR en temps réel CFX96 Touch™ (Bio-Rad). L'ARN peut être conservé dans le conservateur d'acide nucléique total de Norgen jusqu'à 60 jours et l'ADN peut être conservé jusqu'à 18 semaines à température ambiante sans modification de la qualité et de la quantité de l'ARN et de l'ADN.

Figure 2. Stabilité de l'ARN provenant de différents types d'échantillons d'écouvillons conservés dans le conservateur d'acide nucléique total de Norgen. L'amplification du gène de la protéine RNase (RP) à partir de 5 échantillons d'écouvillons oropharyngés et de 5 échantillons d'écouvillons nasopharyngés purifiés à l'aide du kit de purification de l'ARN total de Norgen a été validée avec succès à partir des deux types d'échantillons d'écouvillons avec une efficacité élevée (<40 Ct.) par RT-PCR TaqMan en une étape.

Figure 3. Stabilité de l'ADN de différents types d'échantillons d'écouvillons conservés dans le conservateur d'acide nucléique total de Norgen. L'amplification du gène GAPDH à partir de 5 échantillons d'écouvillons oropharyngés et de 5 échantillons d'écouvillons nasopharyngés purifiés à l'aide du kit d'isolation de l'ADN salivaire de Norgen a été validée avec succès à partir des deux types d'échantillons d'écouvillons avec une efficacité élevée (<40 Ct.) par PCR TaqMan.

Figure 4. Effets inhibiteurs du conservateur d'acide nucléique total de Norgen sur la croissance des bactéries, des levures et des virus. L'effet du conservateur d'acide nucléique total de Norgen sur la croissance des micro-organismes a clairement démontré que le conservateur de Norgen inhibe la croissance des virus, des bactéries et des levures, ce qui permet d'obtenir des échantillons non infectieux qui peuvent être manipulés et expédiés en toute sécurité.

Figure 5. Application en aval de l'ARN et de l'ADN conservés dans les écouvillons. L'application de l'ARN ou de l'ADN purifié à partir d'échantillons d'écouvillons oropharyngés conservés a été évaluée pour détecter la RNase P (gène de maintien) et l'ARNr 16S (ADN bactérien) à partir d'échantillons d'écouvillons prélevés sur 60 donneurs et conservés à température ambiante pendant une nuit. Chaque échantillon d'écouvillon contient différents niveaux de cellules, ce qui contribue au Ct variable de chaque détection de gène, mais tous ont passé les critères d'acceptation pour une RT-PCR et une PCR valides (< 35Ct, ligne rouge) dans la réaction de 20 µL, ce qui indique que l'ARN et l'ADN d'écouvillon conservés dans le conservateur d'acide nucléique total de Norgen sont de haute qualité pour les applications en aval, telles que la RT-PCR et la PCR en temps réel.

Spécifications du kit
Stabilité de l'ADN à température ambiante	4 mois
Stabilité de l'ARN à température ambiante	2 mois

Conditions de stockage et stabilité du produit

Les tubes de conservation de l'acide nucléique total peuvent être conservés à température ambiante jusqu'à 1 an sans diminution des performances du kit. La date limite de conservation est indiquée sur l'étiquette du tube et sur l'étiquette de la boîte du kit.