唾液 RNA 采集和保存设备 Dx

概述

Norgen 的唾液 RNA 采集和保存设备 Dx 设计用于1) 安全、无创的自我唾液标本采集；2) 在环境温度下保存唾液标本中的 RNA。50 个唾液 RNA 采集和保存设备 Dx 均由 3 个组件组成：(1) 唾液采集漏斗和采集管，(2) 采集管盖，(3) 密封可挤压安瓿中的 Norgen 唾液 RNA 保存剂。唾液采集通过监督下的自我采集进行。唾液样本的采集方法是将唾液吐在与采集管组装在一起的采集漏斗内。采集所需体积的唾液后，取出采集漏斗，然后加入保存剂安瓿中的内容物并与采集的唾液混合。唾液采集管随后被送往实验室进行 RNA 分离和分析。可使用 Norgen 的唾液/拭子 RNA 纯化试剂盒 Dx（类别号：Dx69100、Dx69300）从保存的唾液样本中分离 RNA。Norgen 的每个采集管都标有唯一的序列号，可用于对样本进行安全、匿名追踪。保存样本中的唾液 RNA 在室温下可稳定保存 2 个月。该试剂盒非常适合采集和保存用于体外诊断的 RNA 样本。该试剂盒可用于采集和保存病毒 RNA，包括用于检测 COVID-19 的 SARs-CoV-2 RNA。

Norgen 的唾液 RNA 采集和保存设备 Dx 不提供诊断结果。用户有责任结合下游体外诊断检测使用和验证这些设备。

唾液 RNA 保存剂

Norgen 的唾液 RNA 保存剂是一种水性储存缓冲液，设计用于快速裂解细胞并随后保存新鲜唾液样本中的 RNA。这种缓冲液无需立即处理或冷冻样本，可在环境温度下将样本运送到集中检测设施。缓冲液的成分可使样本在室温下保存长达 2 个月。唾液 RNA 保存剂还能灭活唾液样本中的所有细菌、酵母菌和病毒。

从保存剂中分离核酸

可使用 Norgen 的唾液/棉签 RNA 纯化试剂盒 Dx（类别号：Dx69100、Dx69300）从保存的唾液样本中分离唾液 RNA。为尽量减少诊断结果的不规则性，应使用适合下游应用的控制装置。

细节

支持数据

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图 1.诺健唾液 RNA 保存剂中保存的 RNA 在室温下的稳定性可达 2 个月。从众多供体中采集唾液样本并混合，然后在唾液中加入等量的 Norgen 唾液 RNA 保存剂。然后将保存的唾液在室温下储存 2 个月。随后，在第 0 天、第 4 天、第 6 天、第 16 天、第 1 个月和第 2 个月，使用与诺尔基因总 RNA 纯化试剂盒（类别号：17200）相关的补充方案，从 0.25 mL 唾液/保存剂样本中分离唾液 RNA。为了进行可视化分析，将 50 µL 洗脱液中的 7.5 µL 与 RNA 上载染料混合，并在 1x MOPS 琼脂糖凝胶上运行。唾液样本在 Norgens 唾液 RNA 保存中常温保存长达 2 个月后，RNA 的完整性得以保持。

图 2.在 2 个月的时间里，三种家务基因保持稳定。在诺健唾液 RNA 保存中常温保存的唾液样本中监测 GAPDH、人类 18S rRNA 和 β 肌动蛋白基因。在第 0 天、第 4 天、第 6 天、第 10 天、第 16 天、第 30 天和第 60 天，使用 Norgen 的总 RNA 纯化试剂盒（类别号：Cat.Norgen）从 250 µL 保存样本中分离 RNA。17200）相关的补充方案，从 0.25 mL 唾液/保存剂样本中分离唾液 RNA。然后，使用 CFX96 TouchTM实时聚合酶链式反应检测系统 (Bio-Rad) 将 4 µL 洗脱液用于 20 µL 的实时聚合酶链式反应 (SYBR Green I)。在两个月的时间里，所有基因都得到了保存和稳定。

图 3.Norgens 唾液 RNA 保存剂可在室温下 1:1 的理想范围外使用 3 天，成功保存唾液 RNA 样本。当加入 2 mL 唾液 RNA 保存剂的唾液量从 0.2 mL 增加到 3 mL 时，使用一步式 RT-PCR 监测 RNA 蛋白和 β 肌动蛋白基因的稳定性。结果表明，唾液输入量的变化对 RNA 基因的检测没有明显影响。

图 4.从保存的唾液样本中检测病毒、细菌和人类 RNA。将从一名健康供体采集的唾液（2 mL）与 2 mL 唾液 RNA 保存剂混合。来自 2019-nCoV TaqMan RT-PCR Kit（E/RdRP 基因）的 Norgens COVID-19 阳性对照（类别号：TM67200）与 HeLa 细胞（1.6 m cells /ml ）一起添加到保存的唾液中，以生成一个假样本。使用 Norgens 总 RNA 纯化试剂盒（类别号：17200）和 5 个基因（16s rRNA、COVID-19 E 基因、RdRP-P1 和 P2 基因以及 RP）进行聚合酶链式反应或 RT-PCR 分析，以检测病毒、细菌和人类基因。

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