总 RNA 纯化试剂盒 - 旋转柱 Plus 微型试剂盒
从少量输入中快速纯化总 RNA（包括 microRNA）
总 RNA 纯化试剂盒 - 旋转柱 Plus 微型试剂盒
从少量输入中快速纯化总 RNA（包括 microRNA）
概述
Norgen 的总 RNA 纯化 Plus Micro 试剂盒提供了一种快速、灵敏的方法，可从少量输入的培养动物细胞、组织样本和显微解剖样本（包括激光捕获显微切割 (LCM)）中分离和纯化总 RNA。该试剂盒可纯化各种大小的 RNA，从大 mRNA 和核糖体 RNA 到微 RNA (miRNA) 和小干扰 RNA (siRNA）。使用基因组 DNA 去除柱从样本中去除基因组 DNA，并优先从蛋白质等其他细胞成分中纯化 RNA，而无需使用苯酚或氯仿。纯化后的 RNA 具有最高的完整性，可用于多种下游应用，包括实时聚合酶链式反应、反转录 PCR、Northern 印迹、RNase 保护和引物延伸以及表达阵列检测。
Norgen 的净化技术
纯化采用旋转柱色谱法，使用 Norgen 的专利树脂作为分离基质。在不使用苯酚或氯仿的情况下，可优先从蛋白质等其他细胞成分中纯化 RNA。该过程包括首先用提供的缓冲液 RL 裂解相关细胞或组织（请参见第 4 页的流程图）。然后用基因组 DNA 移除柱捕获 DNA。然后将乙醇加入 DNA 去除步骤的流出液中，并将溶液装入 RNA 纯化微柱。Norgen 树脂结合 RNA 的方式取决于离子浓度。因此，只有 RNA 才会与色谱柱结合，而杂质蛋白质则会在流过过程中被去除或保留在树脂顶部。然后用提供的清洗液 A 清洗结合的 RNA，以去除任何残留的杂质，并用洗脱液 A 洗脱纯化的总 RNA。微量旋转柱的特殊设计允许较小的洗脱体积小至 20 μL。纯化后的 RNA 具有最高的完整性，可用于多种下游应用。
细节
支持数据
图 1.极高的隔离灵敏度Norgen 的总 RNA 纯化 Plus Micro 试剂盒可从单个细胞中灵敏提取 RNA。从数量不断减少的 HeLa 细胞中提取总 RNA，然后通过 RT-qPCR 检测分离 RNA 中的人类 S14 转录本。只要一个细胞就能检测到 S14 的聚合酶链式反应产物。
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试剂盒规格
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色谱柱最大结合能力
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35 μg
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最大色谱柱装载量
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650 μL
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| 最小洗脱体积 | 20 μL |
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纯化的 RNA 大小
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所有大小，包括小 RNA（< 200 nt） |
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起始材料的最大用量： |
5 x 105 个细胞 最多 7.5 mL |
| 完成 10 次净化所需时间 |
22 分钟
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| 平均产量* HeLa 细胞 (1 x 105 个细胞) |
1.5 μg
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* 纤维组织需要额外的蛋白酶 K 处理
储存条件和产品稳定性
所有溶液都应密封保存在室温下。该试剂盒在发货后 1 年内保持稳定。