Dispositivos de recogida y conservación de ADN de la saliva

Descripción general del producto

Los dispositivos de recogida y conservación de ADN en saliva de Norgen están diseñados para 1) la recogida sencilla y no invasiva de saliva y 2) la conservación del ADN en muestras de saliva a temperatura ambiente. Cada uno de los 50 dispositivos de recogida y conservación de ADN de saliva consta de 3 componentes: (1) Embudo de recogida de saliva y tubo de recogida, (2) tapón del tubo de recogida y (3) conservante de ADN de saliva de Norgen contenido en una ampolla sellada que se puede apretar. Las muestras de saliva se recogen escupiendo dentro del embudo de recogida que se ha ensamblado con el tubo de recogida. Después de recoger el volumen necesario de saliva, se retira el embudo de recogida y se añade el contenido de la ampolla de conservante y se mezcla con la saliva recogida. El tubo de recogida de saliva se envía posteriormente al laboratorio para el aislamiento y análisis del ADN. El ADN puede aislarse de las muestras de saliva conservadas utilizando el Kit de aislamiento de ADN en saliva de Norgen (Cat# RU45400). Cada uno de los tubos de recogida de Norgen está etiquetado con un número de serie único que puede utilizarse para un seguimiento seguro y anónimo de la muestra. El ADN salival de las muestras conservadas es estable durante más de 2 años a temperatura ambiente. Este kit es ideal para recoger y conservar muestras de ADN para estudios epidemiológicos y de población.

Conservante del ADN de la saliva

El conservante de ADN de saliva de Norgen es un tampón acuoso de almacenamiento diseñado para la lisis celular rápida y la posterior conservación del ADN de muestras frescas. El tampón impide el crecimiento de bacterias y hongos gramnegativos y grampositivos, y también inactiva los virus, lo que permite manipular y enviar con seguridad las muestras no infecciosas resultantes. Además, el tampón elimina la necesidad de procesar o congelar inmediatamente las muestras y permite enviarlas a instalaciones de análisis centralizadas a temperatura ambiente. Los componentes del tampón permiten almacenar las muestras durante más de 2 años sin que se produzca ninguna degradación detectable del ADN.

Aislamiento de ADN a partir de conservante

Antes del aislamiento del ADN de la saliva, agite en vórtex durante 10 segundos el tubo de recogida que contiene la saliva conservada e incube a 55°C durante una hora. Ahora se puede aislar el ADN de saliva de las muestras de saliva conservadas utilizando cualquier método disponible en el mercado, incluido el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat# RU45400), el kit de aislamiento de ADN de saliva de 96 pocillos de Norgen (Cat. RU35200) y el kit de aislamiento de ADN de saliva (sistema de microesferas magnéticas) de Norgen (Cat. RU55400, RU62900). Además, el kit de reactivos de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (hasta 4 ml) (Cat. RU35720) permite aislar el ADN de las muestras de saliva conservadas mediante un método de precipitación con alcohol. El ADN purificado es de la máxima calidad y puede utilizarse en diversas aplicaciones posteriores, como PCR, NGS y análisis de micromatrices.

Detalles

Datos de respaldo

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Figura 1. Estabilidad del ADN conservado en el conservante de ADN de saliva de Norgen a temperatura ambiente durante más de 2 años. Se recogieron muestras de saliva de numerosos donantes, se mezclaron y, a continuación, se añadió a la saliva un volumen igual de conservante de ADN para saliva de Norgen. A continuación, la saliva conservada se almacenó a temperatura ambiente durante un máximo de 24 meses. Posteriormente, se aisló ADN de saliva a los 4, 8, 16 y 24 meses a partir de 0,5 mL de la muestra de saliva/conservante utilizando el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat. RU45400). Para el análisis visual, se pasaron 100 µl del ADN purificado en un gel TAE de agarosa. Como puede observarse, no hay indicios de degradación del ADN después de almacenar las muestras de saliva durante 24 meses a temperatura ambiente en el conservante de ADN de saliva de Norgen. Además, el tamaño del ADN se mantuvo por encima de 24 kb durante todo el periodo de 24 meses. M: Escala de ADN UltraRanger 1 Kb de Norgen (Cat. 12100).

Figura 2. Amplificación por PCR en tiempo real de GAPDH del ADN de muestras de saliva almacenadas a temperatura ambiente desde el día 0 hasta los 24 meses. Todas las muestras de ADN de saliva aisladas se amplificaron con éxito sin ningún signo de inhibición de la PCR ni diferencia en Ct. Rojo: Día 0, Azul: 4 meses, Púrpura: 8 meses, Verde: 16 meses y Azul cielo: 24 meses. Negro: No hay control de plantillas.

Figura 3. Amplificación por PCR de ARNr 16s V3-V4 para la preparación de bibliotecas de ARNr 16s Illumina MiSeq. El ADN de saliva se aisló utilizando el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat. RU45400) de saliva que había sido conservada durante varios periodos de tiempo de hasta 2 años a temperatura ambiente en Conservante de ADN de Saliva de Norgen. El resultado de la PCR muestra la amplificación limpia de la PCR a ~550 pb indicando la diana correcta de V3-V4 ARNr 16s , sin diferencias entre el día 0 y los 24 meses. M: Escalera de ADN FastRunner (Cat. 12800)

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Documentación