Tubos de conservación total de ácidos nucleicos
Para la conservación y el transporte de ácidos nucleicos totales de muestras recogidas con un hisopo
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Tubos de conservación total de ácidos nucleicos
Para la conservación y el transporte de ácidos nucleicos totales de muestras recogidas con un hisopo
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Descripción general del producto
Los tubos de conservación de ácidos nucleicos totales de Norgen están diseñados para la conservación y el transporte a temperatura ambiente de ácidos nucleicos totales (ADN y ARN) procedentes de muestras recogidas con un hisopo, incluidas las nasales, bucales, salivales, fecales, cutáneas, superficiales, etc. Los tubos de conservación de ácidos nucleicos totales contienen el conservante de heces de Norgen en formato líquido. El usuario simplemente recoge la muestra utilizando un hisopo estéril de nylon flocado (no suministrado) y, a continuación, transfiere el hisopo al conservante de ácidos nucleicos totales. El conservante impide la proliferación de bacterias y hongos gramnegativos y grampositivos, y también inactiva los virus, lo que permite manipular y enviar con seguridad las muestras no infecciosas resultantes. Además, el conservante de ácidos nucleicos totales elimina la necesidad de procesar o congelar inmediatamente las muestras y permite enviarlas a instalaciones de análisis centralizadas a temperatura ambiente. Los componentes del conservante permiten almacenar muestras de ADN a temperatura ambiente durante más de 4 meses y muestras de ARN a temperatura ambiente durante más de 2 meses. Las muestras de hisopos recogidas y conservadas con los tubos de conservación de ácidos nucleicos totales de Norgen son compatibles con la mayoría de los métodos de aislamiento de ADN y ARN disponibles en el mercado. Las muestras almacenadas en los tubos se han utilizado con éxito con la mayoría de los kits y reactivos de aislamiento de ADN y ARN de Norgen Biotek, incluido el kit de purificación de ARN total de Norgen (Cat# 17200) y el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat# RU45400). Para la purificación de ácidos nucleicos totales, consulte el protocolo complementario suministrado con el kit de purificación de ARN total de Norgen (Cat. nº 17200).
Detalles
Datos de respaldo
Figura 1. Estabilidad del ARN y el ADN almacenados en el conservante de ácidos nucleicos totales de Norgen. La GAPDH (para el ADN) y la β-actina (para el ARN) se controlaron durante un periodo de 18 semanas para el ADN y de 60 días para el ARN a partir de muestras de hisopos almacenadas a temperatura ambiente en tubos de conservación de ácidos nucleicos totales de Norgen. Se aisló el ARN de 250 µl de muestras de hisopo conservadas el día 0, el día 4, el día 6, el día 10, el día 16, el día 30 y el día 60 utilizando el Kit de Aislamiento de ARN Total de Norgen (Cat.# 17200). Se aisló ADN de 250 µl de muestras de hisopo conservadas el día 0 y a las 18 semanas utilizando el Kit de Aislamiento de ADN de Saliva de Norgen (Cat# Dx45400). A continuación, se utilizaron 4 µl de elución en una reacción de PCR en tiempo real de 20 L utilizando el sistema de detección de PCR en tiempo real CFX96 Touch™ (Bio-Rad). El ARN puede almacenarse en el conservante de ácidos nucleicos totales de Norgen hasta 60 días y el ADN puede almacenarse hasta 18 semanas a temperatura ambiente sin que se produzcan cambios en la calidad y cantidad de ARN y ADN.
Figura 2. Estabilidad del ARN de diferentes tipos de muestras de torunda almacenadas en el conservante de ácidos nucleicos totales de Norgen. La amplificación del gen de la proteína RNasa (RP) a partir de 5 muestras de hisopos orofaríngeos y 5 muestras de hisopos nasofaríngeos purificados utilizando el kit de purificación de ARN total de Norgen se validó con éxito a partir de ambos tipos de muestras de hisopos con alta eficiencia (<40 Ct.) mediante RT-PCR TaqMan de un paso.
Figura 3. Estabilidad del ADN de diferentes tipos de muestras de torunda almacenadas en el conservante de ácidos nucleicos totales de Norgen. La amplificación del gen GAPDH a partir de 5 muestras de hisopo orofaríngeo y de 5 muestras de hisopo nasofaríngeo purificadas utilizando el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen se validó con éxito a partir de ambos tipos de muestras de hisopo con alta eficiencia (<40 Ct.) mediante PCR TaqMan.
Figura 4. Efectos inhibitorios del conservante de ácidos nucleicos totales de Norgen sobre el crecimiento de bacterias, levaduras y virus. El efecto del conservante de ácidos nucleicos totales de Norgen sobre el crecimiento de microorganismos demostró claramente que el conservante de Norgen inhibe el crecimiento de virus, bacterias y levaduras, con lo que se obtienen muestras no infecciosas que pueden manipularse y enviarse con seguridad.
Figura 5. Aplicaciones posteriores del ARN y el ADN conservados en torunda. Se evaluó la aplicación del ARN o ADN purificado a partir de muestras conservadas de hisopos orofaríngeos para detectar la RNasa P (gen de mantenimiento) y el ARNr 16S (ADN bacteriano) a partir de muestras de hisopos recogidas de 60 donantes y conservadas a temperatura ambiente durante la noche. Cada muestra individual de torunda contiene diferentes niveles de células, lo que contribuye a la Ct variable de la detección de cada gen, pero todas superaron los criterios de aceptación para una RT-PCR y PCR válidas (< 35Ct, línea roja) en la reacción de 20 µL, lo que indica que el ARN y ADN de torunda conservado almacenado en el conservante de ácidos nucleicos totales de Norgen es de alta calidad para aplicaciones posteriores, como la RT-PCR y PCR en tiempo real.
Especificaciones del kit |
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Estabilidad del ADN a temperatura ambiente |
4 meses |
Estabilidad del ARN a temperatura ambiente |
2 meses |
Condiciones de almacenamiento y estabilidad del producto
Los tubos de conservación de ácidos nucleicos totales deben almacenarse a temperatura ambiente. Los tubos se pueden utilizar hasta la fecha de vencimiento especificada en la etiqueta de la caja.
Documentación
Inactivation of Coronavirus in Samples using Norgen's Saliva RNA Preservative
Comparison of Norgen’s Saliva/Swab RNA Purification Kit to a Magnetic Bead-Based Competitor's Kit for Viral RNA Extraction
Automation of Norgen’s Pathogen/Viral Nucleic Acid Isolation Kit to Detect Viruses and Pathogens...