Para la recogida, almacenamiento a temperatura ambiente y transporte de ADN de muestras recogidas con un hisopo
Sistema de recogida de hisopos y conservación de ADN
Para la recogida, almacenamiento a temperatura ambiente y transporte de ADN de muestras recogidas con un hisopo
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Descripción general del producto
El sistema de recogida y conservación de ADN con hisopo de Norgen está diseñado para la recogida, almacenamiento a temperatura ambiente y transporte de ADN de muestras recogidas con un hisopo, incluidas las nasales, bucales, de saliva, fecales, de piel, de superficies, etc. El sistema de recogida de hisopos y conservación de ADN contiene el conservante de hisopos de Norgen en formato líquido. El usuario simplemente recoge la muestra utilizando el hisopo suministrado y luego lo transfiere al conservante de hisopos. El conservante de hisopos impide el crecimiento de bacterias y hongos gramnegativos y grampositivos, y también inactiva los virus, lo que permite manipular y enviar con seguridad las muestras no infecciosas resultantes. Además, el conservante de hisopos elimina la necesidad de procesar o congelar inmediatamente las muestras y permite enviarlas a las instalaciones de pruebas centralizadas a temperatura ambiente. Los componentes del conservante de hisopos permiten conservar las muestras de ADN a temperatura ambiente durante más de 2 años.
Aislamiento de ADN a partir de conservante
Las muestras de hisopos recogidas y conservadas con el sistema de recogida y conservación de ADN de Norgen son compatibles con la mayoría de los métodos de aislamiento de ADN. Las muestras almacenadas en los tubos se han utilizado con éxito con la mayoría de los kits y reactivos de aislamiento de ADN de Norgen Biotek. Un procedimiento de aislamiento optimizado está disponible como parte del Kit de Aislamiento de ADN del Microbioma de Norgen (Cat. 64100).
Detalles
Supporting Data
Figure 1. Stability of DNA Preserved in Norgen's Saliva DNA Preservative at Room Temperature for up to 75 Months.
Saliva samples were collected from numerous donors and mixed, and then an equal volume of Norgen's Saliva DNA Preservative was added to the saliva. The preserved saliva was then stored at room temperature for up to 75 months. Saliva DNA was subsequently isolated at 1 week, 3 weeks, 1 month, 2 months, 4 months, 6 months, 8 months, 12 months, 20 months, 32 months, 40 months, 52 months and 75 months from 0.5 mL of the saliva/preservative sample using Norgen's Saliva DNA Isolation Kit (Cat. RU45400). For visual analysis, 100 µL of the purified DNA was run on an agarose TAE gel. As it can be seen, there is no evidence of DNA degradation after the saliva samples are stored for 75 months at ambient temperatures in Norgen's Saliva DNA Preservative. Furthermore, the size of the DNA was maintained over 24 kb for the entire 75-month period. M: Norgen's UltraRanger 1 Kb DNA Ladder (Cat. 12100).
Figure 2. Detection of GAPDH Using Taqman Real-time PCR from the Saliva Samples Stored at Room Temperature from 1 Week Up to 75 Months.
The quality of the saliva DNA stored at room temperature did not change from 1 week to 75 months, as indicated by the fact that the Ct values remained consistent. The improvement in the Ct values from the real-time PCR graph (red) also indicate the impact of the improved saliva DNA isolation method provided by the Saliva DNA Isolation Kit (Cat. RU45400).
Figure 3. Real Time PCR Amplification of Saliva DNA from the saliva samples stored at room temperature from 1 week up to 75 months (13 time points).
All isolated saliva DNA samples were successfully amplified without any sign of PCR inhibition. Blue: Saliva DNA isolated using improved Saliva DNA Isolation Kit (Cat. RU45400). Black: No template control.
Figure 4. Illumina MiSeq 16s rRNA metagenomics data from saliva samples preserved for over 6 years using Norgen's Swab DNA Preservative.
The saliva DNA was isolated using Norgen's Saliva DNA Isolation Kit (Cat. RU45400) from saliva that had been preserved for various periods of time up to 6 years at room temperature. A) Principal Coordinate Analysis of 12 saliva microbiomes showing differences in the distribution of taxonomic classifications between samples up to kingdom level. B) Hierarchical clustering of 12 saliva microbiomes based on genus-level classifications, including a bar chart showing the relative abundance of genus-level classifications for each sample in the dendrogram.
Datos de respaldo
Figura 1. Estabilidad del ADN conservado en el conservante de ADN en hisopo de Norgen a temperatura ambiente hasta 75 meses. Se recogieron muestras de saliva de numerosos donantes, se mezclaron y, a continuación, se añadió a la saliva un volumen igual de conservante de ADN en hisopo de Norgen. A continuación, la saliva conservada se almacenó a temperatura ambiente durante un máximo de 75 meses. Posteriormente, se aisló ADN de saliva a la semana, a las 3 semanas, al mes, a los 2 meses, a los 4 meses, a los 6 meses, a los 8 meses, a los 12 meses, a los 20 meses, a los 32 meses, a los 40 meses, a los 52 meses y a los 75 meses a partir de 0,5 mL de la muestra de saliva/conservante utilizando el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat. RU45400). Para el análisis visual, se pasaron 100 µl del ADN purificado en un gel TAE de agarosa. Como puede observarse, no hay indicios de degradación del ADN después de almacenar las muestras de saliva durante 75 meses a temperatura ambiente en el conservante de ADN para hisopos de Norgen. Además, el tamaño del ADN se mantuvo por encima de 24 kb durante todo el periodo de 75 meses. M: Escala de ADN UltraRanger 1 Kb de Norgen (Cat. 12100).
Figura 2. Detección de GAPDH mediante PCR Taqman en tiempo real a partir de muestras de saliva almacenadas a temperatura ambiente desde 1 semana hasta 75 meses. La calidad del ADN de saliva almacenado a temperatura ambiente no varió entre 1 semana y 75 meses, como indica el hecho de que los valores Ct se mantuvieron constantes. La mejora en los valores Ct del gráfico de PCR en tiempo real (rojo) también indica el impacto del método mejorado de aislamiento de ADN de saliva proporcionado por el kit de aislamiento de ADN de saliva (Cat. RU45400).
Figura 3. Amplificación del ADN de la saliva mediante PCR en tiempo real a partir de muestras de saliva almacenadas a temperatura ambiente desde 1 semana hasta 75 meses (13 puntos temporales). Todas las muestras de ADN de saliva aisladas se amplificaron con éxito sin ningún signo de inhibición de la PCR. Azul: ADN de saliva aislado utilizando el kit mejorado de aislamiento de ADN de saliva (Cat. RU45400). Negro: No hay control de plantillas.
Figura 4. Datos metagenómicos de MiSeq 16s ARNr de Illumina de muestras de saliva conservadas durante más de 6 años con el conservante de ADN para hisopos de Norgen. El ADN de saliva se aisló utilizando el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat. RU45400) a partir de saliva conservada durante distintos periodos de tiempo, hasta 6 años, a temperatura ambiente. A) Análisis de coordenadas principales de 12 microbiomas de saliva que muestran diferencias en la distribución de las clasificaciones taxonómicas entre las muestras hasta el nivel de reino. B) Agrupación jerárquica de 12 microbiomas de saliva basada en clasificaciones a nivel de género, incluido un gráfico de barras que muestra la abundancia relativa de clasificaciones a nivel de género para cada muestra en el dendrograma.
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Especificaciones del kit
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Volumen de conservante
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1.2 mL
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Temperatura de conservación
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Temperatura ambiente
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| Tiempo de conservación |
2 años a temperatura ambiente
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Conservación y manipulación
Cuando se almacenan a temperatura ambiente, los tubos conservantes de hisopos de Norgen no utilizados son estables hasta la fecha de caducidad sin que se reduzca su rendimiento. Consulte la fecha de caducidad en el prospecto o en la etiqueta del tubo.
Documentation
- in a timely manner that considers the person's accessibility needs due to disability; and
- at a cost that is no more than the regular cost charged to other persons
