Purificación rápida de ARN total -incluido microARN - a partir de pequeños volúmenes de entrada
Kit de purificación de ARN unicelular
Purificación rápida de ARN total -incluido microARN - a partir de pequeños volúmenes de entrada
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Descripción general del producto
Kit muy sensible diseñado para trabajar con una sola célula y hasta 100.000 células. El diseño especial de la microcolumna de centrifugación permite un pequeño volumen de elución de tan sólo 8 µl.
Método rápido de 15 minutos para el aislamiento y purificación de ARN total (incluyendo miARN) a partir de pequeñas cantidades de células animales cultivadas, CTC, células madre, células inmuno-clasificadas y muestras microdiseccionadas incluyendo microdisección por captura láser (LCM). El ARN purificado es de la máxima pureza e integridad, y puede utilizarse en diversas aplicaciones de qRT-PCR y PCR digital y otras aplicaciones del transcriptoma completo.
Detalles
Supporting Data
Figure 1. Better Efficiency of RNA Recovery at Single Cell Input.
Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit allows sensitive RNA extraction from as little as a single cell and outperforms competitor’s kits that claim similar sensitivity. Total RNA was extracted from a decreasing number of HeLa cells using Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit and a competitor’s spin column purification kit. The extracted RNA was subjected to RT-qPCR to detect the human S15 and 5S rRNA transcript in the isolated RNA. RNA isolated by Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit showed much higher relative expression of each RNA transcript tested at all cell input numbers down to single cell.
Figure 2. High Quality RNA Isolated from Laser-Captured Microdissection (LCM).
Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit allows sensitive but high-quality RNA extraction from small inputs such as Laser-Captured Microdissection (LCM). Total RNA was isolated from 6 different LCM samples. RNA yield and quality (260/280 ratio) were assessed by NanoVue spectrophotometry. Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit recovered good amounts of RNA with an excellent 260/280 ratio.
Figure 3. Consistent and Linear Recovery of All Sizes of RNA down to Single Cell Input.
Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit allows sensitive RNA extraction from as little as a single cell with great linearity. Total RNA was extracted from a decreasing number of HeLa cells using Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit. The extracted RNA was subjected to RT-qPCR to detect all sizes of RNA, including the human S15 (mRNA), 5S rRNA transcript (small RNA), and miR-21 (microRNA). RNA isolated by Norgen’s Single Cell RNA Purification Kit showed very high consistency (over 99%) of recovery of each RNA transcript tested at all cell input numbers down to a single cell.
Datos de respaldo
Figura 1. Mayor eficacia de la recuperación de ARN en la entrada de células individuales. El kit de purificación de ARN unicelular de Norgen permite la extracción sensible de ARN a partir de una sola célula y supera a los kits de la competencia que afirman tener una sensibilidad similar. El ARN total se extrajo de un número decreciente de células HeLa utilizando el kit de purificación de ARN de célula única de Norgen y un kit de purificación de columna de centrifugación de la competencia. El ARN extraído se sometió a RT-qPCR para detectar el transcrito humano S15 y 5S ARNr en el ARN aislado. El ARN aislado mediante el kit de purificación de ARN unicelular de Norgen mostró una expresión relativa mucho mayor de cada transcrito de ARN analizado en todos los números de entrada de células hasta el unicelular.
Figura 2. Aislamiento de ARN de alta calidad a partir de la microdisección por captura láser (LCM). El Kit de Purificación de ARN de Célula Única de Norgen permite la extracción sensible pero de alta calidad de ARN a partir de pequeñas entradas como la Microdisección por Captura con Láser (LCM). Se aisló el ARN total de 6 muestras diferentes de LCM. El rendimiento y la calidad del ARN (relación 260/280) se evaluaron mediante espectrofotometría NanoVue. El kit de purificación de ARN unicelular de Norgen recuperó buenas cantidades de ARN con una excelente relación 260/280.
Figura 3. Recuperación coherente y lineal de todos los tamaños de ARN hasta la entrada de una sola célula. El Kit de Purificación de ARN de Célula Única de Norgen permite la extracción sensible de ARN a partir de una sola célula con gran linealidad. El ARN total se extrajo de un número decreciente de células HeLa utilizando el kit de purificación de ARN de célula única de Norgen. El ARN extraído se sometió a RT-qPCR para detectar todos los tamaños de ARN, incluido el S15 humano (ARNm), el transcrito de ARNr 5S (ARN pequeño) y miR-21 (microARN). El ARN aislado mediante el kit de purificación de ARN unicelular de Norgen mostró una consistencia muy alta (más del 99 %) de recuperación de cada transcrito de ARN analizado en todos los números de células de entrada hasta una sola célula.
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Especificaciones del kit
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Capacidad máxima de unión de la columna
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10 μg
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Volumen máximo de carga de la columna
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650 μL
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Volumen mínimo de elución
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8 μL |
| Tamaño del ARN purificado |
Todos los tamaños, incluido el ARN pequeño (<200 nt)
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Cantidad máxima de material de partida: Células animales Microdisección por captura láser (LCM) |
de una a 2 x 105 células Hasta 2 x 105 células |
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Tiempo para completar 10 purificaciones
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20 minutos
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Rendimiento medio: Células HeLa (1 x 105 células) Células HeLa (100 células) Células HeLa (1 células) |
~ 1.5 µg ~ 1.5 ng ≥ 1pg |
Condiciones de almacenamiento y estabilidad del product
Todas las soluciones deben mantenerse herméticamente cerradas y conservarse a temperatura ambiente. Este kit es estable durante 2 años a partir de la fecha de envío.
Documentation
- in a timely manner that considers the person's accessibility needs due to disability; and
- at a cost that is no more than the regular cost charged to other persons