Sistema de recogida y conservación de ácidos nucleicos en heces
Sistema todo en uno para la recogida, conservación, envío y almacenamiento rápidos y sencillos de muestras de heces.
Sistema de recogida y conservación de ácidos nucleicos en heces
Sistema todo en uno para la recogida, conservación, envío y almacenamiento rápidos y sencillos de muestras de heces.
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Descripción general del producto
El sistema de recogida y conservación de ácidos nucleicos en heces de Norgen es un sistema completo diseñado para la recogida, almacenamiento a temperatura ambiente y transporte de ácidos nucleicos de muestras de heces. - Cada una de las 50 fundas contiene: guantes de nitrilo, hisopos con alcohol, papel de recogida Fe-Col® y el tubo de recogida y conservación de ácidos nucleicos en heces de Norgen, que contiene conservante de heces de Norgen en formato líquido. El usuario simplemente recoge la muestra de heces utilizando el papel de recogida Fe-Col® suministrado y, a continuación, transfiere las heces al tubo de recogida y conservación de ácido nucleico en heces utilizando la cuchara acoplada a la tapa. A continuación, la muestra se mezcla suavemente hasta que las heces queden bien sumergidas bajo el conservante. El conservante de heces elimina la necesidad de procesar o congelar inmediatamente las muestras y permite enviarlas a instalaciones de análisis centralizadas a temperatura ambiente. Los componentes del conservante de heces permiten conservar las muestras a temperatura ambiente durante más de 2 años para el ADN y hasta 7 días para el ARN. Para prolongar la estabilidad del ARN fecal en el conservante, se recomienda almacenarlo a -20°C o -70°C desde su llegada a las instalaciones de pruebas hasta la purificación del ARN. El conservante de heces también impide el crecimiento de bacterias y hongos gramnegativos y grampositivos, y también inactiva los virus, lo que permite manipular y enviar con seguridad las muestras no infecciosas resultantes.
Detalles
Datos de respaldo
Figura 1. La mejor conservación de Norgen. Resumen de los cambios de la comunidad en respuesta a las soluciones estabilizadoras durante un periodo de almacenamiento de 14 días. Distancia de Bray-Curtis hacia la referencia para cada paciente agrupado por solución estabilizadora. Se muestran la mediana y los intervalos del percentil 5 al 95 tanto para la variabilidad entre alícuotas como entre pacientes (adaptado de Plauzolles et al, 2022). Norgen es el más similar a las muestras de heces congeladas, por encima de otros 11 métodos de recogida y almacenamiento de muestras.
Figura 2. Integridad del ADN y el ARN fecales totales aislados de muestras de heces conservadas. El ADN y el ARN se aislaron a partir de 200 µl de heces conservadas de 4 donantes diferentes (líneas A a D) almacenadas a temperatura ambiente en los puntos temporales indicados (ADN a los 27 meses y ARN a los 7 días) utilizando el Kit de Aislamiento de Ácido Nucleico en Heces de Norgen (Cat. nº 45600). A continuación, 10 µl de los 75 µl de ácido nucleico eluido se cargaron en un gel para su análisis visual. Se aisló ADN de heces de alta integridad a partir de muestras de heces conservadas que se almacenaron a temperatura ambiente durante 27 meses, y se aisló ARN de alta integridad a partir de muestras de heces almacenadas durante 7 días a temperatura ambiente. El carril M es HighRanger 1 kb DNA Ladder de Norgen (Cat. #11900).
Figura 3. Seguimiento de la estabilidad del ADN de adenovirus (Ad5subE1) introducido en muestras de heces conservadas mediante el ensayo de PCR TaqMan en tiempo real. Las muestras de heces conservadas se enriquecieron con 6 x 109 ufp/mL de adenovirus y se extrajeron 200 µl de muestras en los momentos indicados. A continuación, se aisló el ADN fecal utilizando el kit de aislamiento de ADN fecal de Norgen (Cat# 27600). A continuación, se utilizaron 2 µl de molde de ADN de cada 50 µl de elución en una reacción de PCR de 20 µl para detectar el ADN de adenovirus. Se demostró que el conservante de heces estabiliza el ADN de adenovirus hasta 21 semanas a temperatura ambiente, lo que indica que los tubos de recogida y conservación de ácido nucleico en heces de Norgen proporcionan un sistema de transporte de muestras seguro y cómodo.
Figura 4. Agrupación jerárquica de muestras de heces a nivel de filo en diferentes condiciones de almacenamiento. La composición microbiana de las muestras de heces conservadas en tubos Norgens de recogida y conservación de ácido nucleico en heces (Cat. 45630, 45660) no difirieron significativamente de la de los controles (heces frescas del Día 0 a RT) durante un período de 2 días, mientras que las muestras de heces no conservadas mostraron un distanciamiento en el dendrograma del perfil original de las heces.
Figura 5. Diferencia en los 5 microorganismos más abundantes a nivel de filo en comparación con las heces frescas (día 0). La abundancia de Firmicuties, Bacteroidetes y proteobacterias de la muestra de heces conservadas fue superior a la de las heces no conservadas (NP) a las heces frescas después de 2 días de almacenamiento a temperatura ambiente, lo que indica que la originalidad del perfil de microorganismos de las heces conservadas es mucho más parecida a la de las heces frescas (día 0).
Figura 6. Abundancia relativa de géneros bacterianos entre muestras de heces conservadas y no conservadas almacenadas a temperatura ambiente durante 2 días. Muestra de heces conservada utilizando los Tubos de Recogida y Conservación de Ácidos Nucleicos en Heces de Norgen (Cat. 45630, 45660) mostraron una relatividad cerrada con la muestra de heces frescas (Día 0).
Figura 7. Correlación entre lecturas bacterianas metagenómicas duplicadas utilizando (A) heces frescas (día 0) y heces conservadas a RT durante 2 días y (B) heces frescas (día 0) y heces no conservadas a RT durante 2 días. Se observó un R2 mayor para las heces frescas (día 0) y las heces conservadas, lo que sugiere una mayor consistencia entre la muestra de heces frescas y la muestra de heces conservadas.
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Especificaciones del kit
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| Estabilidad de los ácidos nucleicos fecales a temperatura ambiente |
2 años para el ADN, hasta 7 días para el ARN*
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* La estabilidad del ARN variará en función de las muestras
Condiciones de almacenamiento y estabilidad del producto
Si se conservan a temperatura ambiente, los tubos conservantes de heces de Norgen no utilizados son estables hasta la fecha de caducidad sin que disminuya su eficacia. Consulte la fecha de caducidad en el prospecto o en la etiqueta del tubo.