Para una purificación rápida del ARN total, incluido el microARN, sin el uso de fenol
Kit de purificación de ARN Total maxi
Para una purificación rápida del ARN total, incluido el microARN, sin el uso de fenol
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Supporting Data
Figure 1. Isolate a Diversity of RNA Species.
Total RNA was isolated from 10 mL of an overnight E. coli culture using Norgen's Total RNA Purification Maxi Kit. One microliter of the 2 mL elution was analyzed on an Agilent® 2100 BioAnalyzer RNA Nano 6000 chip. As it can be seen, high-quality total RNA was isolated with minimal degradation. As well, a large amount of small RNA (< 200 nt) was recovered, indicating that the kit is able to isolate a diversity of RNA species.
Figure 2. Good Amplification and Consistency of Isolation.
Norgen's Total RNA Purification Maxi Kit was used to isolate total RNA from six different overnight samples of E. coli (10 mL samples). In brief, one microgram of the isolated RNA was subjected to a 20 µL reverse transcription using Invitrogen Superscript III. Three microliters of the reverse transcription were used as the template in a 20 µL qPCR reaction using 16S rRNA E. coli specific primers and Bio-Rad iQ mix. As it can be seen, the RNA was detected and successfully amplified in all cases. Furthermore, all samples showed a similar Ct value, indicating consistent isolation.
Figura 1. Aísla una diversidad de especies de ARN. El ARN total se aisló a partir de 10 mL de un cultivo de E. coli de una noche utilizando el Kit de Purificación de ARN Total Maxi de Norgen. Se analizó un microlitro de la elución de 2 ml en un chip Agilent® 2100 BioAnalyzer RNA Nano 6000. Como puede observarse, se aisló ARN total de alta calidad con una degradación mínima. Además, se recuperó una gran cantidad de ARN pequeño (< 200 nt), lo que indica que el kit es capaz de aislar una diversidad de especies de ARN.
Figura 2. Buena amplificación y consistencia del aislamiento. Se utilizó el Kit de Purificación de ARN Total Maxi de Norgen para aislar el ARN total de seis muestras diferentes de E. coli de una noche (muestras de 10 mL). En resumen, un microgramo del ARN aislado se sometió a una transcripción inversa de 20 µl utilizando Superscript III de Invitrogen. Se utilizaron tres microlitros de la transcripción inversa como molde en una reacción qPCR de 20 µl utilizando cebadores específicos de E. coli 16S rRNA y la mezcla Bio-Rad iQ. Como puede verse, el ARN se detectó y amplificó con éxito en todos los casos. Además, todas las muestras mostraron un valor Ct similar, lo que indica un aislamiento coherente.
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Especificaciones del kit
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Capacidad máxima de unión de la columna
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1.5 mg
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Volumen máximo de carga de la columna
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20 mL
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| Tamaño del ARN purificado |
Todos los tamaños, incluido el ARN pequeño
(< 200 nt) |
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Cantidad máxima de material de partida
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Tejido hepático
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100 mg
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Tejido cardiaco
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50 mg
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Tejido renal
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100 mg
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Tejido cerebral
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250 mg
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| Tejido pulmonar |
100 mg
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Sangre entera
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2 – 10 mL*
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| Bacterias | 2.5 x 10 10 células |
| Levadura |
2 x 108 células
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| Hongos |
1 g
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| Tejidos vegetales |
1 g
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| Tiempo para completar 4 purificaciones |
40 minutos
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Rendimiento medio:
Células HeLa (5 x 107 células) E. coli (2.5 x 1010 células) |
~750 μg
~1.5 mg |
*Fara aislar el ARN total de leucocitos purificados
Condiciones de almacenamiento y estabilidad del producto
Todas las soluciones deben mantenerse herméticamente cerradas y conservarse a temperatura ambiente. Este kit es estable durante 2 años a partir de la fecha de envío.
Documentation
- in a timely manner that considers the person's accessibility needs due to disability; and
- at a cost that is no more than the regular cost charged to other persons