Kit de Purification de l'ARN Total Plus
Pour la purification de l'ARN total - y compris le microARN - avec élimination rapide de l'ADNg
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Kit de Purification de l'ARN Total Plus
Pour la purification de l'ARN total - y compris le microARN - avec élimination rapide de l'ADNg
Aperçu du produit
Ce kit purifie l'ARN total, y compris le miRNA, à partir d'échantillons biologiques et utilise une colonne supplémentaire pour l'élimination efficace de l'ADNg contaminant, remplaçant ainsi l'étape enzymatique de la DNase.
Extraction efficace de l'ARN total à partir d'une gamme d'échantillons comprenant des cellules, des bactéries, des levures, des virus et des fluides corporels tels que le plasma/sérum, le sang, la salive, le LCR et bien d'autres encore. Extraction d'ARN de haute qualité et pureté avec d'excellentes valeurs RIN et A260/A280 adaptées aux applications en aval, notamment la qRT-PCR, la RT-PCR, les microréseaux, la NGS et bien plus encore.
Le kit purifie toutes les tailles d'ARN, des grands ARNm aux microARN (miARN) en passant par les lncARN, dans la même fraction, sans nécessiter de phénol. Isoler toutes les séquences d'ARN à un taux égal, quelle que soit leur taille. En outre, lorsque les séquences d'ARN sont petites (par exemple, miARN), la colonne lie les petits ARN indépendamment de leur teneur en GC.
Détails
Données justificatives
Figure 1. Élimination de l'ADN génomique des cellules HeLa.. Le kit de purification de l'ARN total plus de Norgen est unique en ce sens qu'il contient une colonne d'élimination de l'ADN génomique, ce qui permet d'éliminer l'ADNg sans utiliser d'enzymes. Les cellules HeLa sont passées dans la colonne d'élimination de l'ADNg ou n'ont pas été traitées pour l'élimination de l'ADNg. La colonne d'élimination de l'ADN génomique a permis d'éliminer avec succès l'ADNg de 1 million de cellules HeLa (panneau A) et de 1x105 cellules HeLa (panneau B). Pour les panneaux A et B, l'image de gauche montre l'ARN sur un gel d'EtBR-agarose à 1,2 %, afin de mieux visualiser toute contamination par l'ADNg. L'image de droite montre
Figure 2. Valeurs Delta Ct observées entre les différentes techniques d'élimination de l'ADNg. Il est bien connu que l'ADN génomique contamine les échantillons d'ARN et, par conséquent, les résultats de la RT-qPCR. Par conséquent, pour déterminer la quantité de contamination par l'ADN génomique dans les échantillons d'ARN, une RT-qPCR peut être utilisée pour comparer les valeurs de Ct observées avec et sans transcription inverse de l'échantillon d'ARN. C'est ce qu'on appelle le Delta Ct. Un million et 1x105 cellules HeLa ont été soit passées dans la colonne d'élimination de l'ADNg ou soit soumises à un traitement à l’ADNase en utilisant la ADNase I sans ribonucléase de Norgen (Cat# 25710). La colonne d'élimination de l'ADNg a éliminé l'ADNg de la même manière qu'un traitement à l’ADNase. Pour des quantités plus importantes (c'est-à-dire 1 million de cellules HeLa), la colonne d'élimination de l'ADNg a permis d'éliminer davantage de contamination par l'ADNg des échantillons d'ARN que le traitement par l’ADNase. Lorsque les apports ont été réduits, la quantité de contamination par l'ADN génomique dans l'échantillon traité par l’ADNase était similaire à celle de l'échantillon passé par la colonne d'élimination de l'ADNg. Ces deux méthodes sont efficaces pour éliminer la contamination par l'ADNg dans les échantillons d'ARN.
Kit Specifications
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Maximum Binding Capacity Per Column
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Up to 50 μg RNA
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Maximum Loading Volume Per Spin Column
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650 μL
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Size of RNA Purified
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All sizes, including < 200 nt
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Time to Complete 10 Purifications |
25 minutes
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Maximum Amount of Starting Material
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Liver Tissue
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20 mg
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Heart Tissue
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5 mg
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Kidney Tissue
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20 mg
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Brain Tissue
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25 mg
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Lung Tissue |
20 mg
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Spleen Tissue
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20 mg
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Whole Blood
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100 µL
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Hela Cells
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3 x 106
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CHO |
3 x 106
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Yeast |
1 x 108 cells
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E.coli |
1 x 109 CFU/mL
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Bacteria | 1 x 109 cells | ||
Plasma/Serum | 200 µL | ||
Fungi |
50 mg
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Plant Tissue |
50 mg
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Viruses |
≤100 µL of viral suspension
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Average Yield
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All solutions should be kept tightly sealed and stored at room temperature. This kit is stable for 1 year after the date of shipment.