Kits de purification d'exosomes de plasma/sérum et d'isolation de l'ARN
Préservation d'ARN de haute qualité, y compris l'ARN viral, jusqu'à 2 mois
Kits de purification d'exosomes de plasma/sérum et d'isolation de l'ARN
Préservation d'ARN de haute qualité, y compris l'ARN viral, jusqu'à 2 mois
Aperçu du produit
Les dispositifs de collecte et de préservation d’ARN salivaire Dx de Norgen sont conçus pour 1) l’auto-collection supervisé sûr et non invasif d’échantillons de salive et 2) la préservation d’ARN dans les échantillons de salive à température ambiante. Chacun des 50 dispositifs Dx de collecte et de préservation d'ARN de la salive est composé de 3 éléments : (1) entonnoir et tube de collection de salive, (2) bouchon du tube de collection, et (3) conservateur d'ARN de salive de Norgen contenu dans une ampoule compressible scellée. La collection de salive se fait par auto-collection supervisé. Les échantillons de salive sont recueillis en crachant à l'intérieur de l'entonnoir de collecte qui a été assemblé avec le tube de collecte. Après avoir recueilli le volume de salive nécessaire, l'entonnoir de collecte est retiré et le contenu de l'ampoule de conservation est ajouté et mélangé à la salive recueillie. Le tube de collection de salive est ensuite envoyé au laboratoire pour l'isolement et l'analyse d'ARN. L'ARN peut être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide des kits de purification d'ARN de la salive de Norgen (Cat# Dx69100, Dx69300). Chaque tube de collecte est étiqueté avec un numéro de série unique qui peut être utilisé pour un suivi sécurisé et anonyme de l'échantillon. L'ARN de la salive dans les échantillons conservés est stable jusqu'à 2 mois à température ambiante. Ce kit est idéal pour collecter et préserver des échantillons d'ARN en vue d'un diagnostic in vitro à des fins médicales. Ce kit peut être utilisé pour collecter et préserver l'ARN viral, y compris l'ARN du SARs-CoV-2 pour la détection du COVID-19.
Les dispositifs de prélèvement et de conservation de l'ARN de la salive Dx de Norgen ne fournissent pas de résultat diagnostique. Il est de la seule responsabilité de l'utilisateur d'utiliser et de valider ces dispositifs en conjonction avec un essai de diagnostic in vitro en aval.
CONSERVATEUR DE L'ARN SALIVAIRE
Le conservateur d’ARN salivaire de Norgen est un tampon de stockage aqueux conçu pour la lyse cellulaire rapide et la préservation ultérieure de l’ARN des échantillons de salive fraîche. Le tampon élimine la nécessité de traiter ou de congeler immédiatement les échantillons et permet de les expédier à température ambiante vers des installations d'essai centralisées. Les composants du tampon permettent de conserver les échantillons jusqu'à 2 mois à température ambiante. Le conservateur d'ARN salivaire inactive également toutes les bactéries, levures et virus présents dans l'échantillon de salive.
ISOLATION DE L'ACIDE NUCLÉIQUE À PARTIR D'UN CONSERVATEUR
L'ARN de la salive peut être isolé à partir des échantillons de salive conservés à l'aide des kits de purification de l'ARN de la salive/du tampon Dx de Norgen (Cat# Dx69100, Dx69300). Pour minimiser les irrégularités dans les résultats du diagnostic, il convient d'utiliser des contrôles appropriés pour les applications en aval.
Détails
Données justificatives
Figure 1. Isolement de l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma. Le mini kit de purification des exosomes et d'isolement de l'ARN du plasma/sérum de Norgen (Cat# 58300) a été utilisé pour isoler l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma à l'aide du même kit. Deux microlitres de l'ARN isolé ont ensuite été utilisés comme modèle dans les réactions de RT-qPCR pour évaluer l'amplification du miR-26a exosomal plasmatique isolé. (A) Le miR-26a exosomal plasmatique diminue linéairement avec l'augmentation du volume de l'échantillon. (B) La quantité relative de miR-26a exosomal dans le plasma montre une excellente linéarité avec un pourcentage de récupération de plus de 90 %.
Figure 2. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma en utilisant différentes méthodes de purification. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma en utilisant le mini kit de purification d'exosomes et d'isolement d'ARN pour plasma/sérum de Norgen (Cat# 58300), le kit du concurrent S et le kit du concurrent L (à partir du plasma). Les exosomes purifiés à l'aide du kit de Norgen ont été remis en suspension dans 200 µL de tampon ExoR de Norgen, dilués à 1:1 000 et visualisés sur l'instrument NanoSight LM10. L'analyse montre que le kit de Norgen a isolé des exosomes de 55 nm avec une récupération de 9,64 x 1013 particules/mL de plasma. Aucune impureté n'a été décelée dans les exosomes purifiés à l'aide du kit de purification des exosomes de plasma/sérum et d'isolement de l'ARN de Norgen. En outre, des exosomes avec une gamme de taille plus large couvrant 50 nm - 150 nm ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma avec une concentration plus élevée par rapport aux deux autres méthodes.
Figure 3. Exosomes intacts purifiés à partir de 1 ml et 10 ml de plasma. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma à l'aide du mini kit de purification d'exosomes et d'isolement d'ARN pour plasma/sérum de Norgen (Cat# 58300) et à partir de 10 ml de plasma à l'aide du maxi kit de purification d'exosomes et d'isolement d'ARN pour plasma/sérum de Norgen (Cat# 58600). Les exosomes purifiés à l'aide du mini kit de Norgen ont été remis en suspension dans 200 µL de tampon ExoR de Norgen, tandis que les exosomes purifiés à l'aide du Maxi kit de Norgen ont été remis en suspension dans 600 µL de tampon ExoR de Norgen, dilués à 1:1 000 et visualisés sur l'instrument NanoSight LM10. L'analyse montre que la purification des exosomes est linéaire puisque 4,04 x 1010 particules/mL ont été récupérées à partir de 1 mL de plasma, tandis que 2,95 x 1011 particules/mL ont été récupérées à partir de 10 mL de plasma.
Figure 4. Isolement de l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma. Le kit Midi de purification des exosomes et d'isolation de l'ARN du plasma/sérum de Norgen (Cat# 58500) a été utilisé pour isoler l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma à l'aide du même kit. Deux microlitres de l'ARN isolé ont ensuite été utilisés comme modèle dans les réactions de RT-qPCR pour évaluer l'amplification du miR-26a exosomal plasmatique isolé. (A) Le miR-26a exosomal plasmatique diminue de façon linéaire avec l'augmentation du volume de l'échantillon. B) La quantité relative de miR-26a exosomal dans le plasma montre une excellente linéarité avec un pourcentage de récupération de plus de 90 %.
Figure 5. Isolement de l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma. Le kit Maxi de purification des exosomes et d'isolation de l'ARN du plasma/sérum de Norgen (Cat# 58600) a été utilisé pour isoler l'ARN des exosomes purifiés à partir de différents volumes de plasma à l'aide du même kit. Deux microlitres de l'ARN isolé ont ensuite été utilisés comme modèle dans les réactions de RT-qPCR pour évaluer l'amplification du miR-26a exosomal plasmatique isolé. (A) Le miR-26a exosomal plasmatique diminue de façon linéaire avec l'augmentation du volume de l'échantillon. B) La quantité relative de miR-26a exosomal dans le plasma montre une excellente linéarité avec un pourcentage de récupération de plus de 90 %.
Figure 6. Des exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 ml de plasma en utilisant différentes méthodes de purification. Les exosomes intacts ont été purifiés à partir de 1 mL de plasma en utilisant le mini kit de purification des exosomes et d'isolement de l'ARN du plasma/sérum de Norgens (Cat# 58300), le kit du concurrent S et le kit du concurrent L (à partir du plasma). Les exosomes purifiés à l'aide du kit Norgens ont été remis en suspension dans 200 µL de tampon Norgens ExoR, dilués à 1:1 000 et visualisés sur l'instrument NanoSight LM10. L'analyse montre que le kit de Norgen a isolé des exosomes de 55 nm avec une récupération de 9,64 x 10^13 particules/mL de plasma. Aucune impureté n'a été trouvée dans les exosomes purifiés à l'aide du mini kit de purification des exosomes de plasma/sérum et d'isolation de l'ARN de Norgens. De plus, des exosomes avec une gamme de taille plus large couvrant 50 nm - 150 nm ont été purifiés à partir de 1 mL de plasma avec une concentration plus élevée par rapport aux deux autres méthodes.
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Kit Specifications
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| Minimum Plasma/Serum Input |
50 μL
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Maximum Plasma/Serum Input
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1 mL
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Size of Exosomes Purified
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40 nm - 150 nm
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| Size of RNA Purified | All sizes, including miRNA and small RNA (< 200 nt) |
| Elution Volume | 50-100 μL |
| Time to Complete 10 Purifications |
35 - 40 minutes
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| Average Yields* | Variable depending on specimen |
*Please check page 4 of the product insert for the average yields and the common RNA quantification methods.
Storage Conditions and Product Stability
All solutions should be kept tightly sealed and stored at room temperature. This kit is stable for 2 years after the date of shipment. It is recommended to warm Lysis Buffer A for 20 minutes at 60°C if any salt precipitation is observed.
Important Note
This kit is suitable for the purification of exosomes from fresh or frozen serum or plasma prepared from blood collected on either EDTA or Citrate. Plasma samples prepared from blood collected on heparin should not be used as heparin can significantly interfere with many downstream applications such as RT-PCR.