Kits de purification de l'ADN circulant exempt de cellules du plasma/sérum Pour une purification rapide et simple de l'ADN circulant exempt de cellules à partir d'échantillons de plasma/sérum Kits de purification de l'ADN circulant exempt de cellules du plasma/sérum Pour une purification rapide et simple de l'ADN circulant exempt de cellules à partir d'échantillons de plasma/sérum SKU FR-55500 Variations Format Micro Mini Midi Maxi Size 50 préparations Quantity Trouver un distributeur Contact Aperçu du produit Détails Citations Aperçu du produit Ces kits constituent une méthode rapide, fiable et pratique d'isolement de l'ADN circulant libre de cellules (ADN-cfc) de haute qualité, de grande pureté et sans inhibiteur, à partir de volumes d'échantillons de plasma/sérum. L'ADN-cfc purifié du plasma/sérum est entièrement compatible avec toutes les applications en aval, y compris la PCR, la qPCR, la PCR sensible à la méthylation et l'analyse par transfert de Southern, les microréseaux et la NGS. Contexte L'ADN circulant libre de cellules dans le plasma/sérum (ADN-cfc) a le potentiel de fournir des biomarqueurs pour certains cancers et états pathologiques ainsi que l'ADN fœtal dans le sang maternel. Actuellement, des progrès significatifs sont réalisés dans l'utilisation de l'ADN-cfc comme biomarqueurs pour le diagnostic précoce, le pronostic et le suivi de la thérapie pour plusieurs types de cancer et de maladies auto-immunes. L'ADN mitochondrial acellulaire (ADN-cfmt) fait également l'objet d'études pour déterminer son importance clinique. Cet ADN-cfc est généralement présent sous forme de courts fragments de moins de 1000 pb. En outre, l'ADN fœtal acellulaire a été largement utilisé comme méthode non invasive de diagnostic prénatal, notamment pour l'identification précoce du sexe du fœtus, les études génétiques pour les familles présentant un risque élevé de troubles génétiques héréditaires, le dépistage du facteur Rhésus, le dépistage de l'aneuploïdie et l'identification de la prééclampsie. Kit micro de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum Idéal pour manipuler des volumes initiaux de plasma/sérum allant de 10 μL à 200 μL. Le kit est conçu pour isoler toutes les tailles d’ADN-cfc à partir d'échantillons de plasma/sérum frais ou congelés et l'ADN purifié est élué dans un volume d'élution flexible allant de 25 µL à 50 µL. Kit mini de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum Idéal pour manipuler des volumes initiaux de plasma/sérum allant de 200 μL à 500 μL. Le kit est conçu pour isoler toutes les tailles d’ADN-cfc à partir d'échantillons de plasma/sérum frais ou congelés et l'ADN purifié est élué dans un volume d'élution flexible allant de 25 µL à 50 µL. Kit Midi de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum Idéal pour manipuler des volumes initiaux de plasma/sérum allant de 1 ml à 4 ml. La première colonne traitera le grand volume de fluides corporels qui sera suivi d'une concentration sur une mini-colonne pour une élution finale de 25 µL à 50 µL. Kit Maxi de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum Idéal pour traiter des volumes initiaux de plasma/sérum allant de 5 ml à 10 ml. La première colonne traitera le grand volume de fluides corporels qui sera suivi d'une concentration sur une mini-colonne pour une élution finale de 25 µl à 50 µl. Détails Données justificatives Previous Figure 1. Le kit micro de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a été utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 50 µL, 100 µL et 200 µL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant, et a été comparé au kit du concurrent Q. Deux microlitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans des réactions de qPCR pour évaluer la quantité relative du gène de l'ARNr 5S purifié. La quantité relative du gène de l'ARNr 5S augmente de façon linéaire avec l'augmentation du volume d'entrée de l'échantillon. Le kit de Norgen a montré la récupération la plus cohérente et la plus élevée du gène d'ARNr 5S d'entretien par rapport à l'autre méthode d'isolement. Figure 2. Le kit micro de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen est utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 50 µL, 100 µL et 200 µL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant. Deux microlitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans les réactions de qPCR pour évaluer la linéarité du gène de l'ARNr 5S purifié à partir des différents volumes de plasma. Le kit micro de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a permis de récupérer 96 % du gène de l'ARNr 5S à partir de 100 µl de plasma par rapport à la quantité présente dans 50 µl de plasma. En outre, 97 % du gène de l'ARNr 5S a été récupéré à partir de 200 µL de plasma par rapport à la quantité présente dans 100 µL de plasma. Figure 3. L'ADN a été isolé à partir de 50 µL, 100 µL et 200 µL de plasma à l'aide du Kit micro de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum. Des volumes croissants de l'élution (2, 4 et 8 µL) ont été utilisés dans une réaction qPCR de 20 µL pour observer toute diminution de la valeur Ct. Une augmentation des valeurs Ct avec l'augmentation de la quantité de matrice serait une indication claire de la présence d'inhibiteurs de la PCR dans l'échantillon. Une augmentation du volume d'élution utilisé comme modèle dans la qPCR n'a pas affecté la valeur Ct générée par la qPCR et, en fait, les valeurs Ct ont tendance à diminuer avec l'augmentation du volume d'entrée de la PCR, ce qui indique que l'ADN purifié à partir du plasma à l'aide du kit de Norgen est exempt des inhibiteurs courants généralement présents dans le plasma. Figure 4. Le kit mini de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a été utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 200 µL, 300 µL et 400 µL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant, en comparaison avec les kits du concurrent Q. Deux microlitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans des réactions de qPCR pour évaluer la quantité relative du gène de l'ARNr 5S purifié. La quantité relative du gène de l'ARNr 5S augmente de façon linéaire avec l'augmentation du volume d'entrée de l'échantillon. Le kit de Norgen a montré la récupération la plus cohérente et la plus élevée du gène d'ARNr 5S d'entretien par rapport à l'autre méthode d'isolement. Figure 5. Le kit mini de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a été utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 200 µL, 300 µL et 400 µL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant. Deux microlitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans les réactions de qPCR pour évaluer la linéarité du gène de l'ARNr 5S purifié à partir des différents volumes de plasma. Le mini kit de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a permis de récupérer 98 % du gène de l'ARNr 5S à partir de 300 µL de plasma par rapport à la quantité présente dans 200 µL de plasma. En outre, 98 % du gène de l'ARNr 5S a été récupéré à partir de 400 µL de plasma par rapport à la quantité présente dans 300 µL de plasma. Figure 6. L'ADN a été isolé à partir de 200 µL, 300 µL et 400 µL de plasma à l'aide du kit mini de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de Norgen pour le plasma/sérum. Des volumes croissants de l'élution (2, 4 et 8 µL) ont été utilisés dans une réaction qPCR de 20 µL pour observer toute diminution de la valeur Ct. Une augmentation des valeurs Ct avec l'augmentation de la quantité de matrice serait une indication claire de la présence d'inhibiteurs de la PCR dans l'échantillon. Une augmentation du volume d'élution utilisé comme modèle dans la qPCR n'a pas affecté la valeur Ct générée par la qPCR et, en fait, les valeurs Ct ont tendance à diminuer avec l'augmentation du volume d'entrée de la PCR, ce qui indique que l'ADN purifié à partir du plasma à l'aide du kit de Norgen est exempt des inhibiteurs courants généralement présents dans le plasma. Figure 7.Purification de l'ADN circulant acellulaire à partir de différents volumes de plasma. Le kit Midi de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a été utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 0,5 mL, 1 mL, 2 mL et 4 mL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant, en comparaison avec les kits du concurrent Q. Deux microlitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans des réactions de qPCR pour évaluer la quantité relative du gène de l'ARNr 5S purifié. La quantité relative du gène de l'ARNr 5S augmente de façon linéaire avec l'augmentation du volume d'entrée de l'échantillon. Le kit de Norgen a montré la récupération la plus cohérente et la plus élevée du gène d'ARNr 5S d'entretien par rapport à l'autre méthode d'isolement. Figure 8. Linéarité de l'ADN purifié à partir de volumes croissants de plasma à l'aide du kit Midi de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum. Le kit Midi de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum a été utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 0,5 mL, 1 mL, 2 mL et 4 mL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant. Deux microlitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans les réactions de qPCR pour évaluer la linéarité du gène de l'ARNr 5S purifié à partir des différents volumes de plasma. Le kit Midi de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a permis de récupérer 97 % du gène de l'ARNr 5S à partir de 1 mL de plasma par rapport à la quantité présente dans 0,5 mL de plasma. En outre, 95 % du gène de l'ARNr 5S a été récupéré à partir de 2 mL de plasma par rapport à la quantité présente dans 1 mL de plasma. En outre, 95 % du gène de l'ARNr 5S a été récupéré dans 4 mL de plasma par rapport à la quantité présente dans 2 mL de plasma. Figure 9. Détermination de la quantité d'inhibition présente dans les échantillons d'ADN circulant sans cellules plasmatiques lors de la détection du gène 5S humain. L'ADN a été isolé à partir de 0,5 mL, 1 mL, 2 mL et 4 mL de plasma à l'aide du kit Midi de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum. Des volumes croissants de l'élution (2, 4 et 8 µL) ont été utilisés dans une réaction qPCR de 20 µL afin d'observer toute diminution de la valeur Ct. Une augmentation des valeurs Ct avec l'augmentation de la quantité de matrice serait une indication claire de la présence d'inhibiteurs de la PCR dans l'échantillon. Une augmentation du volume d'élution utilisé comme modèle dans la qPCR n'a pas affecté la valeur Ct générée par la qPCR et, en fait, les valeurs Ct ont tendance à diminuer avec l'augmentation du volume d'entrée de la PCR, ce qui indique que l'ADN purifié à partir du plasma à l'aide du kit Norgen est exempt des inhibiteurs courants généralement présents dans le plasma. Figure 10. Le kit Maxi de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum de Norgen a été utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 5 mL, 8 mL et 10 mL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant, en comparaison avec les kits du concurrent Q. Deux millilitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans des réactions de qPCR pour évaluer la quantité relative du gène de l'ARNr 5S purifié. La quantité relative du gène de l'ARNr 5S augmente de façon linéaire avec l'augmentation du volume d'entrée de l'échantillon. Le kit de Norgen a montré la récupération la plus cohérente et la plus élevée du gène d'ARNr 5S d'entretien par rapport à l'autre méthode d'isolement. Figure 11. Le kit Maxi de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a été utilisé pour purifier l'ADN circulant à partir de 5 mL, 8 mL et 10 mL de plasma préparé à partir de sang prélevé sur du citrate comme anticoagulant. Deux millilitres de l'ADN purifié ont ensuite été utilisés comme matrice dans les réactions de qPCR pour évaluer la linéarité du gène de l'ARNr 5S purifié à partir des différents volumes de plasma. Le kit Maxi de purification de l'ADN circulant sans cellules du plasma/sérum de Norgen a permis de récupérer 94 % du gène de l'ARNr 5S à partir de 8 mL de plasma par rapport à la quantité présente dans 5 mL de plasma. En outre, 96 % du gène de l'ARNr 5S a été récupéré à partir de 10 mL de plasma par rapport à la quantité présente dans 10 mL de plasma. Figure 12. L'ADN a été isolé à partir de 5 mL, 8 mL et 10 mL de plasma à l'aide du kit Maxi de purification de l'ADN circulant exempt de cellules de plasma/sérum. Des volumes croissants de l'élution (2, 4 et 8 µL) ont été utilisés dans une réaction qPCR de 20 µL afin d'observer toute diminution de la valeur Ct. Une augmentation des valeurs Ct avec l'augmentation de la quantité de matrice serait une indication claire de la présence d'inhibiteurs de la PCR dans l'échantillon. Une augmentation du volume d'élution utilisé comme modèle dans la qPCR n'a pas affecté la valeur Ct générée par la qPCR et, en fait, les valeurs Ct ont tendance à diminuer avec l'augmentation du volume d'entrée de la PCR, ce qui indique que l'ADN purifié à partir du plasma à l'aide du kit de Norgen est exempt des inhibiteurs courants généralement présents dans le plasma Next Cliquez pour afficher les données Kit Specifications Minimum Plasma/Serum Input 10 μL Maximum Plasma/Serum Input 200 μL Size of DNA Purified ≥ 50 bp Elution Volume 25-50 μL Time to Complete 10 Purifications 15-20 minutes Average Yields* Variable depending on specimen *Please check page 7 in the product manual for the Plasma/Serum Average Yields and the Common DNA Quantification Methods. Storage Conditions and Product Stability All solutions should be kept tightly sealed and stored at room temperature. This kit is stable for 2 years after the date of shipment. The kit contains a ready-to-use Proteinase K, which is dissolved in a specially prepared storage buffer. The buffered Proteinase K is stable for up to 2 years after the date of shipment when stored at room temperature.
Kits de purification de l'ADN circulant exempt de cellules du plasma/sérum Pour une purification rapide et simple de l'ADN circulant exempt de cellules à partir d'échantillons de plasma/sérum Kits de purification de l'ADN circulant exempt de cellules du plasma/sérum Pour une purification rapide et simple de l'ADN circulant exempt de cellules à partir d'échantillons de plasma/sérum SKU FR-55500 Variations Format Micro Mini Midi Maxi Size 50 préparations Quantity Trouver un distributeur Contact
